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CRE重组酶慢病毒和慢病毒

Cre重组酶病毒现货

Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶。它无需能量和辅助因子,可以特异性识别催化两个loxP位点之间发生同源重组,从而造成DNA的缺失、易位等现象。由于其作用方式高效简单,Cre/loxP定位重组系统已在特定基因的删除、基因功能的鉴定、外源基因的整合、基因捕获及染色体工程等方面得到了有效的利用,在转基因的酵母、植物、昆虫、哺乳动物的体内外DNA重组方面成为一个有力的工具。尤其在诱导型基因剔除(Gene Knockout)小鼠的建立中应用得十分成功,因为通过可诱导表达cre酶的转基因小鼠与从ES细胞途径获得的工程小鼠交配,就能有效地获得诱导型基因剔除小鼠。为此,建立可诱导表达cre的转基因小鼠,对于建立制备诱导型基因剔除小鼠至关重要,而且对于某些采用cre-LoxP系统进行体内研究的项目来说也是必不可少的。

cre-LoxP系统原理

loxP位点中的8bp间隔区是位点中唯一不对称部位,这种非对称性决定了loxP位点具有方向性,从而决定了重组的方向性。在Cre酶的介导下,Cre/loxP定位重组系统在细胞内和离体系统中共有以下3种工作方式:当2loxP位点方向相同时,重组反应的结果是loxP位点之间的DNA 片段被删除;当2loxP位点的方向相反时,Cre介导的重组反应使loxP位点之间的DNA片段倒位;如果2loxP 位点不在同一分子上,比如一个质粒上带有一个loxP位点,而在某个染色体上还有一个loxP位点,那么在Cre重组酶的介导下,质粒DNA 便可以整合到染色体中loxP所在的位置上。


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